- 首頁
- 抗體藥物開發
- Antibody Generation
- Rabbit monoclonal Antibody
Antibody Generation
Recombinant antibody production
Isotype switch/Antibody fragment
Rabbit monoclonal Antibody
一、服務說明
GenScript作為全球領先的客製化抗體製造商,有專業、成熟的研發團隊,從2004年至今,已提供超過15,000個高品質客製化抗體給世界各地的客戶。GenScript擁有成熟的技術,開發出MonoRab™ 兔子單株抗體生產平台,從動物免疫、B細胞分離、放大培養兔子的B細胞、篩選平台到抗體生產,幫助客戶取得高特異性與高親和力的抗體。此外,GenScript亦提供免疫分析研發服務,協助客戶進行免疫學試劑套組開發,接續抗體進一步的開發。
為什麼要選擇兔子單株抗體?
1. Long evolutionary distance:
有些人類抗原無法在小鼠成功引起免疫反應,可嘗試使用兔子免疫。
2. Strong immune response:
相較於小鼠,兔子對於小分子以及半抗原更能引起強烈的免疫反應。(半抗原/hapten: 指因分子量太小,單獨存在時不具有免疫源性的抗原,例如 多醣。)
3. High genetic heterogeneity:
小鼠大多是進行近親繁殖,而兔子品系則較少進行近親繁殖,因此針對抗原所產生的免疫反應多元性更高,較小鼠容易得到高親和性的抗體,生產的抗體類型更多元。
4. Large body size:
因為體型優勢,能夠取得更多量的抗血清以及B細胞數量。
5. High Stability:
兔子抗體天然構型上有額外的雙硫鍵,讓抗體的穩定性更好。
兔子單株抗體應用性
由於先天在演化上特色,應用於學術研究工具、臨床診斷抗體開發以及治療性抗體開發都有很好的優勢。
1. 學術研究:
研究標的為小分子、抗原的相關家族成員彼此胺基酸序列差異小或是特異性辨認轉譯後修飾,在小鼠難以得到專一性抗體下,兔子單株抗體是一個很好的選擇。
2. 臨床診斷:
高特異性及高親和性,適合用來開發體外診斷用抗體 (IVD)
3. 治療性抗體:
抗體的高特異性,在臨床治療的應用上,能夠降低非特異性結合的風險,提高安全性。
4. Anti-Idiotype Antibodies:
大分子或小分子藥物在體內的藥物動力學以及安全性測試,利用專一性辨認藥物的抗體,減少非特異性結合,精準得到分析數據。
二、服務特色
1. Certified Facility
GenScript實驗動物飼養管理擁有全球認證標準-AAALAC及美國NIH標準-OLAW雙認證。
高水準的動物飼養管理有助於獲得精確實驗數據及增加paper被接受度。
目前全台灣僅有10個單位通過AAALAC認證,如:工業技術研究院、國家實驗動物中心等。
圖一:GenScript之抗體製造廠房與雙認證圖示
2. OptimumAntigen™ Design Tool
GenScript獨家OptimumAntigen™ Design Tool可篩選出抗原性最強的區域,避免產生non-surface epitopes狀況,能提供實驗者最適合用於抗體辨認的peptide region,使抗體的辨認性大幅增加。
3. B cell cloning technology
由兔子的PBMC (Peripheral Blood Mononuclear Cell)中,分離出B細胞,以自行開發的技術,分離為單細胞後放大培養B細胞,接續進行抗體抗原結合篩選,最快13週就能交付抗體,速度比傳統的細胞融合快2~4個月,也少去特異性抗體在細胞融合過程丟失的風險;費用更比B細胞的單細胞定序方式更符合經濟考量。
三、服務項目圖二:客製化兔子單株抗體之製造流程
表一:客製化兔子單株抗體之服務項目階段 服務內容 時程 到貨規格 I 動物免疫 4 隻兔子 (快速型免疫/傳統型免疫) • 快速型免疫:5 - 6 週
• 傳統型免疫:8 - 10 週• 抗血清測試報告
• 小量多株抗體純化II B 細胞cloning與篩選 一輪的B細胞分離單細胞放大培養 (應客戶的應用需求進行特異性篩選) 3 週 • 陽性克隆的報告
• 1 ml B細胞培養上清液供客戶測試, 最多可提供50株 (數量可客製化)III 抗體定序 & 小量重組抗體生產與純化 客戶由第II階段選擇5株抗體進行抗體定序,於哺乳類細胞小量表達抗體與純化 3 週 • 抗體定序報告
• 最多提供5株抗體:
(1)重組抗體細胞培養上清液 2ml
(2) 純化重組抗體 0.1 mg (數量可客製化)IV 重組抗體量產 大量重組抗體生產 3 週 依客戶的需求可放大生產與純化
四、案例分享Evaluation of SARS-CoV-2 Spike Protein Extracellular Domain rabbit mAbs generated using MonoRab™
表二:SARS-CoV-2 ECD rabbit mAbs display high affinityAntigen Rabbit mAb Clone ID ka (1/Ms) kd (1/s) KD (M) S-ECD 2F8 2.55E+05 1.00E-06 3.92E-12 S-ECD 3B4 2.46E+05 5.76E-04 2.34E-09 S-ECD 5D10 9.04E+04 1.40E-06 1.54E-11 S-ECD 2F6 1.71E+05 2.84E-05 1.66E-10 S-ECD 3C4 3.31E+04 1.00E-06 3.02E-11
表三:Epitope binning data additionally shows high rabbit mAb diversity.# Rabbit mAb Clone ID EC50 (ng/ml) Epitope 1 3B4 1.145 Epitope 6 2 2F6 1.354 Epitope 2 3 5D10 2.198 Epitope 12 4 3D5 2.402 Epitope 7 5 3C4 2.796 Epitope 4 6 2F8 3.029 Epitope 3 7 2G4 4.523 Epitope 5 8 5F7 4.63 Epitope 4 9 50000 6.144 Epitope 3 10 5H7 6.727 Epitope 13 11 2F12 7.182 Epitope 4 12 3F4 7.723 Epitope 13 13 5A10 8.13 Epitope 14 14 300000 8.327 Epitope 8 15 5C9 11.873 Epitope 13 16 2.00E+12 12.253 Epitope 1