Protein expression system-mammalian-客製化抗體-盟基生物科技股份有限公司

客製化抗體-盟基生物科技股份有限公司

Protein expression system-mammalian

Protein expression system-mammalian

Protein Expression

Protein expression system-mammalian

利用哺乳類系統表現與純化蛋白

 

一、服務說明

GenScript已經成為提供高品質重組蛋白表現與純化服務的領導者,截至目前為止已經有 5,300個的高純度重組蛋白交付至世界各地的客戶。GenScript提供不同的蛋白質表現與純化平台,並且推動蛋白表現與純化技術的多項改進,包括了在細菌、酵母、昆蟲以及哺乳類系統。此外,GenScript亦提供優化服務以及 large-scale protein production。
對於真核蛋白質而言,選擇哺乳類動物作為蛋白質表現系統為最佳的理想選擇,這是由於哺乳動物細胞自身具備蛋白質摺疊與轉譯後修飾之功能,因此哺乳類動物系統可以產生具有功能性的重組蛋白。因此您可選擇哺乳類動物細胞蛋白表現系統,獲取高品質的重組蛋白。同時,也因為哺乳類動物進行表現蛋白更為專業複雜,因此比起利用其他系統進行蛋白質生產為更具艱難且具有風險的任務。GenScript擁有超過 12年經驗製作哺乳類動物蛋白。為了提高且獲得高品質的哺乳類動物蛋白,GenScript開發 MamPower™哺乳類動物蛋白保證方案服務&客制化蛋白質表現服務。

GenScript的MamPower™哺乳動物蛋白表現方案提供利用 CHO或 HEK293細胞為系統,可快速生產高達 10mg且具有純度保證之重組蛋白。您僅需提供目標蛋白序列,GenScript將於4-5週內提供mg級的哺乳動物細胞表達的蛋白,幫助您快速獲得實驗結果。所有 MamPower™皆從 GenScript專利的密碼子優化開始評估優化序列。


表一:總覽GenScript不同系統之蛋白質純化與表現服務
  Bacterial Insect Mammalian
Strain E.coli Sf-9, Sf-21, S-2, Hi-5 CHO, HEK-293
優點 1.便宜
2.易操作、放大
3.快速表現
1.易分泌
2.有後轉譯修飾
3.可表現multi-subunit 蛋白
4.適用有毒基因蛋白
1.全面後轉譯修飾
2.適用表達具活性蛋白
缺點 1.缺乏後轉譯修飾
2.Inclusion bodies
3.難以表現大分子的蛋白
4.不確保真核蛋白的活性
1.醣基化修飾與哺乳動物略有不同
2.生產時間長、費用高
1.生產時間長、費用高
2.蛋白質產量相對底

二、服務特色
1. 可實現轉譯後修飾及正確的蛋白折疊性
2. 穩定或暫時性表現蛋白質
3. 高效啟動子 (CMV, SV40)控制蛋白表現
4. 蛋白質表現量高
5. 可大規模表現蛋白質


三、服務方案
保證型蛋白質表現方案
1. 免費密碼子優化&基因合成
2. 保證蛋白質產量與純度
3. 短工作天: 9 週圖

 
客戶提供 產量 純度 工作天 到貨規格
蛋白質序列 1mg ≥75%
≥85%
≥95%
9-11 週
(從基因合成到蛋白質純化)
-蛋白質基因在pUC57 載體
-純化蛋白
-CoA 報告
3mg
5mg ≥85%
≥95%
10mg
*此方案適用於分泌型蛋白質和膜外的穿膜蛋白extracellular domain (ECD) of membrane proteins ≤150kDa.

客制化蛋白質表現方案
Phase 步驟 服務內容 工作天 到貨規格
 I 基因合成 -密碼子優化&基因合成
-Subclone到合適的表現載體
2-3 weeks -DNA in pUC57
 II 小量蛋白質表現 -Plasmid 製備
-100mL 小量表現+ 1步純化
5-6 weeks -Expression report Purified protein@
III  大量蛋白質表現 -Plasmid 製備(依據放大的表現量)
-1L~10L 的Transient expression +1步純化
5-8 weeks