VHH Antibody Discovery-盟基生物科技股份有限公司

客製化抗體-盟基生物科技股份有限公司

VHH Antibody Discovery

VHH Antibody Discovery

Antibody Generation

VHH Antibody Discovery

來自羊駝的單株抗體

一、服務介紹

VHH (Vderived from heavy chain antibodies)來自於HcAb  (heavy chain antibody)上的可變區,構型有別於一般IgG或其衍生的抗體形式(Figure 1),而駱駝科動物是自然界中,會生產 heavy chain antibody 的物種之一。
 


VHH特色
✓ 分子量很小,只有15KDa
✓ 溶解度高
✓ 結構穩定
✓ 易於生產
✓ 可識別不常見或隱藏的表位
✓ 容易進入酵素的空腔或活性區
✓ 可穿透血腦屏障
✓ 更容易應用於蛋白質工程與藥物開發


 

二、服務應用

VHH可應用於學術研究、臨床診斷、治療性抗體開發與細胞治療,應用方面極廣,可以說是抗體界的明日之星!
     
A.學術研究:活體影像追蹤、免疫染色。 B.臨床治療:治療性抗體、細胞治療。 B.臨床治療❷:攜帶藥物至特定細胞/組織釋放。 C.臨床診斷:BiomarkerIVD試劑開發。


三、服務項目:VHH篩選平台
盟基的合作廠商在羊駝單株抗體開發已有超過 10 年的經驗,根據不同的實驗規模與需求,可以提供兩種抗體篩選平台- Animal Immunization & Naïve Library Screening ,客戶可以選擇最符合需求的方式進行,比較優缺點如下方表格:
 
羊駝抗體篩選平台
特色比較 Animal immunization Naïve library screening
羊駝物種 Alpaca Alpaca
時間(不含抗原製備) 4~5 months 6~10 weeks (勝!)
抗體親和力 較佳 (勝!) 較差~ 中等

1. 篩選平台- Animal immunization
每一隻羊駝只用於單一項目,以成熟的phage display 技術與高通量篩選平台,為客戶提供最專業的客製化生產抗體服務。

(1) 服務保證
1. 自有羊駝養殖場,每隻羊駝只使用於一個項目,絕不重複
2. 最少提供20株特異性抗體序列
3. 獨家的高通量篩選平台,提供多樣性&高產能
4. 抗體品質: in vivo 等級重組抗體


服務流程


(2) 案例分享
Anti-human CD3 VHH antibody screening

動物免疫後利用高通量篩選平台,將500 個clones 用ELISA 的方式篩選,最終挑選出100 多條特異性抗體序列,陽性篩選比例高達23.1%。


2. 篩選平台- Naïve library screening
使用已構建好的naïve VHH phage library,不需要經過動物免疫,直接進入biopanning & screening 步驟,快速得到羊駝抗體。

(1) 服務優勢
1. 交期短:跳過動物免疫直接進行抗原篩選(6~10 週)
2. 方案彈性佳:可自行選購定序與生產的抗體個數
3. Library 多樣性大: 容量>10⁹
4. 成功率高: 目前累計有近30個羊駝抗體的成功案例


服務流程

Antibody Discovery by Phage Display
Specifications Timeline Deliverables
1.1 Protein expression
A.Gene synthesis and carrier construction
B.Protein Expression Evaluation
C.Protein expression and purification
4 weeks 1. 4μg expression plasmid 2. 100μg protein
1.2 Library screening and biopanning
A.Screening of the naïve Alpaca VHH library (4-6 rounds of biopanning) 2-3 weeks 3. Progress report
1.3 ELISA screening
A.Screening and validation by ELISA until at least 3-10 different clones are identified 1 week 4. Progress report
1.4 DNA extraction and antibody sequencing (Alternative)
A.Phage DNA extraction and antibody sequencing 1-2 weeks 5. Progress report
6. DNA sequence of the best clones
1.5 Antibody expression (Alternative)
A.Expression the selected clones by E.coli 2-4 weeks 7. 500ug Antibody per clone 8. Progress report


(2) 案例分享
Anti- GFP VHH antibody in the IP application:
將Anti-GFP VHH antibody 連接磁珠後,與GFP overexpressed-293 cell 反應,比較其免疫沉澱效果。
Lane 2-4 實驗組:GFP-293 cell lysate
Lane 5-7 對照組:293 cell lysate