Yeast viability-客製化抗體-盟基生物科技股份有限公司

Yeast viability

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Live-or-dye 死細胞染劑搭配其他通用染劑,簡單分辨酵母菌死活

產品介紹

Biotium 研發出許多細胞染劑,不只可以染色動物細胞 (mammalian cells),也可以染色酵母菌 (yeast) 和細菌 (bacteria)。這些共通的細胞染劑針對細胞膜、細胞質、DNA (細胞核)、粒線體 (mitochondria)、溶體 (lysosome)、脂肪油滴 (lipid droplet) 和細胞骨架 (cytoskeleton),但是並不是所有染劑都適用於所有細胞種類,詳細資料請見下圖,相關介紹請見 “Yeast stains” (請點我連結)。

 
*Yes 表示可以染色,No 表示不適用,ND 表示沒有確認過。其中括弧部分表示有特殊情況。


Live-or-Dye™ Fixable Viability Staining Kits 
此染劑特別針對死細胞,為無法穿透細胞膜的 amine-reactive dyes,因此只能進入死細胞中,和帶有 amine 的蛋白質共價連接。如果是活細胞,則染劑會和細胞膜表面的蛋白質反應,但是由於細胞膜表面蛋白質較少,因此活細胞的螢光強度遠低於死細胞。應用於 flow cytometry 分析中可以排除掉死細胞。
此染劑十分穩定,因此可以於染色後固定和細胞打洞,螢光不會因此而損失。此染劑可以廣泛地針對所有細胞種類,包括哺乳類細胞、細菌 (gram positive/negative) 和酵母菌 (yeast),特別注意 Live-or-Dye™ NucFix Red 針對 gram positive bacteria 會同時染到活細胞和死細胞。共有11種螢光選擇,方便實驗者做搭配。
 


Yeast Live-or-Dye™ Fixable Live/Dead Staining Kit
此套組含兩種染劑 Thiazole Orange 和 Live-or-Dye™ 568/583,可同時染色活細胞和死細胞。Live-or-Dye™ 568/583 為紅色螢光染劑 (amine-reactive dyes),由於無法穿透細胞膜,因此能專一性地染色死細胞內的細胞質蛋白質。Thiazole Orange 為綠色螢光染劑 (Ex/Em 512/533 nm),可以同時染色 yeast 活細胞和死細胞的細胞核,但經過固定打洞後,染劑會分布在細胞質中。經過此套組染色後,所有細胞皆會被染色綠色螢光 (Ex/Em 512/533 nm),只有死細胞被染色紅色螢光 (Ex/Em 568/583 nm),兩色重疊後,死細胞將會呈現黃色,活細胞呈現綠色。

  
酵母菌 Yeast (S. cerevisiae) 經過 Yeast Live-or-Dye™ Fixable Live/Dead Staining Kit 染色後結果,活的酵母菌呈現綠色 (Thiazole Orange),死的酵母菌呈現黃色 (Thiazole Orange & Live-or-Dye™ 568/583)。

 

Yeast Viability Staining Kit
此套組含兩種染劑,CF® Dye-labeled Concanavalin A (ConA) 和 Live-or-Dye® viability dye,有三種顏色搭配 (Green/Red, Red/Blue, Far-Red/Red)。Live-or-Dye® viability dye 為無法穿透細胞膜的螢光染劑 (amine-reactive dyes),因此能專一性地染色死細胞內的細胞質蛋白質。Concanavalin A (Con A) 為廣泛使用的 lectin (凝集素),能專一性地結合 a-mannopyranosyl 和 a-glucopyranosy 修飾的醣蛋白,這兩個基團常見於酵母菌和真菌的細胞壁,因此此染劑可以染色活細胞和死細胞的細胞壁。經過此套組染色後,所有細胞皆會被 Con A 染色,只有死細胞能被 Live-or-Dye® viability dye 染色,兩色重疊後,死細胞將會呈現兩個染劑的混合光,活細胞呈現 Con A 的標記螢光。

  
酵母菌 yeast (S. cerevisiae) 經過 Yeast Viability Staining Kit 染色結果,CF®640R ConA (far-red 套圖成藍色) 染色所有細胞的細胞壁,而 Live-or-Dye™ 568/583 (red) 染色死細胞的細胞核。

 



Yeast Vitality Staining Kit
用來檢測酵母菌是否在代謝上有活性 (metabolically active),此套組包含兩種染劑 Calcofluor White 和 ViaVac Red/Green。Calcofluor White 為藍色螢光染劑,能夠專一性地結合纖維素 (cellulose) 和幾丁質 (chitin),這兩個化合物常見於真菌、藻類和植物的細胞壁。
ViaVac™ Red/Green 為檢測酵母菌存活與否的染劑,其結構和 FUN 1® (Thermo) 相似。ViaVac 會擴散進入細胞中,染色細胞質並呈現綠色;但在有代謝活性的酵母菌和真菌中,此染劑會被主動運輸到液胞 (vacuole) 中,而呈現紅色的管狀液胞構造。酵母運經過此套組染色後,所有細胞的細胞壁皆會被染上藍色,而只有活細胞才有紅色的囊狀構造。

  
酵母菌 yeast (S. cereviciae) 以 Yeast Vitality Staining Kit 染色,Calcofluor White (blue)染色細胞壁,ViaVac™ Red/Green 染色有代謝活性酵母菌的液胞構造 (red,green 沒顯示)。

  
Calcofluor White Stain (#29067) 染色細胞壁。

  
ViaVac™ Red/Green 染色結果,染色細胞質並呈現綠色;但在有代謝活性的酵母菌和真菌中,此染劑會被主動運輸到液胞 (vacuole) 中,而呈現紅色的管狀液胞構造。




 

產品特色


Live-or-Dye™ 染劑有多樣特色
1.經濟實惠:比起 Thermo Fisher LIVE/DEAD® 染劑較便宜
2.螢光顏色多種選擇:11種螢光可供選擇,方便實驗螢光搭配
3.專一性高:絕對不會染到活細胞
4.可固定:染色後可以固定和細胞打洞
5.應用性高:細胞染色後可於螢光顯微鏡觀察或 flow cytometry 分析。


 

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